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β-gal 報告基因染色試劑盒

更新日(ri)期(qi):2023-12-14

訪問量:1358

廠商性質:生產廠家

所在城市:上海市

簡要描述:
大腸桿菌中的LacZ基因編碼產物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal較穩定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal產生藍色產物,所以可以方便地檢測出LacZ基因的表達。因而,LacZ基因或β-gal常用來作為報告基因,檢測表達載體介導的基因轉移表達效率,此外,也常用于基因啟動子活性的研究。
品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領域醫療衛生,生物產業

 

我(wo)公司(si)的β-半乳糖苷酶(β-gal)報告基因(yin)染色(se)(se)試(shi)劑(ji)盒(he)利用X-gal作為底物(wu),配(pei)合試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)提(ti)供的其他試(shi)劑(ji),可對固定后的細胞、組織(zhi)冰凍(dong)切片(pian)中的β-gal進行顯色(se)(se),陽性結果表現為藍(lan)色(se)(se)。

包裝清(qing)單:

產(chan)品(pin)編號產品名稱(cheng)規格(ge)
SJ1233

β-半乳(ru)糖苷酶(β-gal)

報告基因染色試劑盒

100ML
說明書一(yi)份

保存條件:

-20℃保存,一年(nian)有效。其中(zhong)X-Gal溶(rong)液(ye)需避光保存。

產品組(zu)成(cheng):

產品名稱(cheng)編(bian)號名稱

β-半乳(ru)糖苷酶(mei)(β-gal)

報告(gao)基因染色試劑(ji)盒

SJ1233-A試劑A
SJ1233-B試劑B
SJ1233-C試劑C
SJ1233-D試劑D(X-gal)
SJ1233-E試劑E(10× PBS)

使用(yong)方(fang)法:

使用(yong)前先將(jiang)10 × PBS用(yong)去(qu)離子水稀釋至1× PBS。

染(ran)色工作液需現(xian)(xian)配現(xian)(xian)用,配制方(fang)法如(ru)下:

名(ming)稱用量
試劑(A)25 ul
試劑(B)25 ul
試劑(ji)(C)25 ul
試劑D(X-gal)125 ul
試(shi)劑E(1× PBS)2.3 ml
總量2.5 ml

1、細胞樣品染色

1)培(pei)養的(de)貼壁細胞處(chu)理完(wan)成后,用(yong)4%的(de)多聚甲醛固(gu)定10分鐘(zhong)(zhong)后,用(yong)PBS洗三次(ci),每次(ci)5分鐘(zhong)(zhong),去除多余的(de)PBS;

2)加(jia)入適量的(de)染(ran)色工作液,放入37℃溫箱孵(fu)育(yu)1-24小(xiao)時(35mm培(pei)養(yang)皿或(huo)6孔板一般使(shi)用1.5-2.0ml/皿(孔),其他規格的(de)培(pei)養(yang)皿或(huo)培(pei)養(yang)板可依(yi)據培(pei)養(yang)面積的(de)大小(xiao)適量增加(jia)或(huo)減少染(ran)色液的(de)量);

3)在顯微鏡下觀察,當(dang)染(ran)成藍色(se)的細(xi)胞顏(yan)色(se)適中時(shi),去除染(ran)色(se)液,用1× PBS洗三次。

4)加入(ru)適(shi)量1×; PBS,鏡下觀(guan)察(cha)、拍照(染色(se)后的標本可在4℃保存一(yi)周)

2、組織(zhi)冰(bing)凍(dong)切片染色

1)組(zu)織(zhi)冰凍(dong)切片先用(yong)去離(li)水洗滌3次(ci)(ci),每次(ci)(ci)5分鐘,去除OCT膠;

2)用(yong)PBS洗滌(di)切片3次,吸除PBS;

3)滴(di)加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小(xiao)時,直(zhi)至切片(pian)中(zhong)的細胞的顏色變藍。孵育過程最好在溫盒中(zhong)進行,以防止染(ran)色液(ye)蒸發。

 

5)吸除染色工作(zuo)液,用PBS洗滌切片3次,每次5分鐘。  

6)水性(xing)封片(pian)劑(ji)封片(pian)后,鏡(jing)下觀察。染色(se)后的標本片(pian)在4℃可保存數天。

3、小組織塊染(ran)色

1)組織塊在(zai)4%的多(duo)聚(ju)甲醛固(gu)定液中(zhong)充分固(gu)定后,用自來水沖洗(xi)盡量去除(chu)固(gu)定劑;

2)用PBS浸泡組織塊(kuai)5-10分(fen)種;

3)將(jiang)組織塊轉移至(zhi)染色液中,37℃孵育1-24小時(shi)(染色液的用量(liang)盡(jin)量(liang)大(da)于組織塊體積的10倍);

4)組織(zhi)塊中出現藍色著色后,去除(chu)染(ran)色液,PBS洗滌三次,每次5分種。

5)對組織(zhi)進行拍照,或將組織(zhi)塊進行冰凍切片后鏡下觀察。 

注意事項:

1、在石蠟包埋的(de)(de)過(guo)程中β-半乳糖(tang)苷(gan)酶(mei)可能失(shi)(shi)活,從而造成染色失(shi)(shi)敗,因此本試劑(ji)盒(he)不建議(yi)用(yong)于(yu)石蠟切片的(de)(de)檢(jian)測(ce)。如果一定(ding)要用(yong)于(yu)石蠟切片的(de)(de)檢(jian)測(ce),建議(yi)自行對實驗條(tiao)件(jian)進行一定(ding)的(de)(de)優化。

2、染色時間(jian)較長(chang)時,請在溫盒中進行(xing),或是增加染色液(ye)的(de)量,以防染色液(ye)蒸發(fa)變干(gan)。

   3、染(ran)色后(hou)應(ying)及時觀察、拍(pai)照。放置過久由于藍色產物的擴散,可能會出現部(bu)分假(jia)陽性。

備注:

          產品信息可能會有優化升級,請以實際標簽信息為準。

 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區

 

 為了您的安全和健康,請在實驗過程中做好防護工作。

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